在微生物檢測中常會遇到以下問題，可用以下解決方案

為什么劃不出單個(gè)菌落？

（1）平板上有過多的水分；

（2）在劃線時(shí)沒有反復(fù)灼燒接種環(huán)；

（3）多區(qū)劃線，三區(qū)或四區(qū)劃線，越是稀釋到4區(qū)，間距要越寬。

培養(yǎng)基配制時(shí)應(yīng)注意的問題

①嚴(yán)格控制滅菌溫度，需要按照要求進(jìn)行滅菌操作。如果培養(yǎng)基的含糖量較高，那么滅菌溫度就不能太高，否則就會使糖分焦化，從而影響培養(yǎng)基的質(zhì)量。

②不能反復(fù)融化瓊脂培養(yǎng)基，這會對培養(yǎng)基中的營養(yǎng)成分產(chǎn)生破壞。

③不能對培養(yǎng)基進(jìn)行反復(fù)滅菌，這同樣也會對營養(yǎng)成分產(chǎn)生破壞作用。 

④在對瓊脂培養(yǎng)基進(jìn)行滅菌后需要將其充分搖勻。

⑤需要將培養(yǎng)基完全溶解才能分裝培養(yǎng)基。

培養(yǎng)基的保存

（1）平板：大多數(shù)平板如VRBA、DC、尿素酶生化管、顯色系列等要避光低溫保存。

（2）干粉培養(yǎng)基：避光干燥，結(jié)塊后不能使用。

（3）亞碲酸鉀卵黃增菌液、50%卵黃乳液等：冷凍保存，使用時(shí)，要常溫解凍，不能使用水浴加熱。

（4）抗生素類：冷藏保存，溫度過高會導(dǎo)致靈敏度的下降。

（5）兔血漿：冷藏保存少量的紅色不會影響結(jié)果。

觀察時(shí)間的掌握

按SN、GB等標(biāo)準(zhǔn)或培養(yǎng)基的使用說明所述時(shí)間進(jìn)行觀察，時(shí)間過短或時(shí)間過長，單菌落的特征都不會很明顯。如單增李斯特氏菌顯色培養(yǎng)基，時(shí)間短單菌落看不到卵磷脂環(huán)，時(shí)間長綿羊李氏菌也會產(chǎn)生沉淀環(huán)。OXA、PALCAM的觀察也如此，時(shí)間過長，李氏菌使整個(gè)平板成黑色，不利于觀察單個(gè)菌落。霉菌要3天后要及時(shí)觀察計(jì)數(shù)，防止時(shí)間長成一片。

添加劑的添加

（1）溫度的掌握:卵黃和抗生素類添加的溫度都不應(yīng)太高。

（2）定量: 過多會抑制一些目標(biāo)菌，太少又導(dǎo)致雜菌的過度生長。

培養(yǎng)溫度的掌握

（1）真菌類：25-28℃培養(yǎng)

（2）細(xì)菌類：李氏菌在增菌和生化中要求培養(yǎng)溫度在30℃左右。

（3）其他一般在36℃左右

常用的接種方法

穿刺接種、傾注接種、涂布接種、劃線接種。

 信息來源：https://mp.weixin.qq.com/s/bftpyIgOQiZ_vShJyatG1w