● 知識要點(diǎn)和教學(xué)要求

1)、了解滅菌的原理和方法

2)、了解培養(yǎng)基的滅菌

3)、掌握濕熱滅菌原理和影響滅菌的因素

4)、掌握間歇滅菌

5)、掌握連續(xù)滅菌

● 能力培養(yǎng)要求

通過本章節(jié)的學(xué)習(xí)，學(xué)生能掌握培養(yǎng)基滅菌的原理和方法及其影響滅菌的因素。

● 教案內(nèi)容

由于雜菌的污染，使生物反應(yīng)中的基質(zhì)或產(chǎn)物因雜菌的消耗而損失，造成生產(chǎn)能力的下降;

由于雜菌所產(chǎn)生的一些代謝產(chǎn)物，或在染菌后改變了培養(yǎng)液的某些理化性質(zhì)，使產(chǎn)物 的提取和分離變得困難，造成收率降低或使產(chǎn)品的質(zhì)量下降;

雜菌會(huì)大量繁殖，會(huì)改變反應(yīng)介質(zhì)的PH值，從而使生物反應(yīng)發(fā)生異常變化;

雜菌可能會(huì)分解產(chǎn)物，從而使生產(chǎn)過程失敗;

發(fā)生噬菌體污染，微生物細(xì)胞被裂解，而使生產(chǎn)失敗，等等。

5.1 滅菌的原理和方法

滅菌是指利用物理或化學(xué)法殺或除去物料及設(shè)備中一切有生命物質(zhì)的過程。常用的滅菌方法大致有以下幾種：

1. 化學(xué)試劑滅菌法

常用的化學(xué)試劑有甲醛、氯氣(或次氯酸鈉)、高錳酸鉀、環(huán)氧乙烷等。

2. 電磁波、射線滅菌法

電磁波、紫外線或放射性物質(zhì)

3. 干熱滅菌法

干熱滅菌條件為在160℃下保溫1h。

4. 濕熱滅菌法

利用飽和蒸汽進(jìn)行滅菌的方法稱為濕熱滅菌法。由于蒸汽具有很強(qiáng)的穿透能力，而且在冷凝時(shí)會(huì)放出大量的冷凝熱，很容易使蛋白質(zhì)凝固而殺死各種微生物。從滅菌的效果來看，干熱滅菌不如濕熱滅菌有效，溫度升高10℃時(shí)，滅菌速度常數(shù)僅增加2-3倍，而濕熱滅菌對耐熱芽孢的滅菌速度常數(shù)增加的倍數(shù)可達(dá)到8-10倍，對營養(yǎng)細(xì)胞則更高。同時(shí)，蒸汽的來源方便，價(jià)格低廉，滅菌效果可靠，是目前最為基本的滅菌方法。一般的濕熱滅菌條件為：121℃，30min。

5. 過濾除菌法

利用過濾方法制備無菌空氣。

6. 火焰滅菌法

僅適用于接種針、玻璃棒、三角瓶口等的滅菌。

5. 2培養(yǎng)基的滅菌

但高溫雖然能殺死培養(yǎng)基中的雜菌，同時(shí)也會(huì)破壞培養(yǎng)基中的營養(yǎng)成分，甚至?xí)a(chǎn)生不利于菌體生長的物質(zhì)。因此，在工業(yè)培養(yǎng)過程中，除了盡可能殺死培養(yǎng)基中的雜菌外，還要盡可能減少培養(yǎng)基中營養(yǎng)成分的損失，最常用的滅菌條件是120℃，20-30min。

衡量熱滅菌的指標(biāo)很多，最常用的是“熱死時(shí)間”，即在規(guī)定溫度下殺死一定比例的微生物所需要的時(shí)間。殺死微生物的極限溫度稱為致死溫度，在此溫度下，殺死全部微生物所需要的時(shí)間稱為致死時(shí)間。在致死溫度以下，溫度越高，致死時(shí)間就越短。一些細(xì)菌芽孢菌等微生物細(xì)胞和孢子，對熱的抵抗力不同，因此它們的致死溫度和時(shí)間也有差別，見表5-3和表5-4。微生物對熱的抵抗力常用“熱阻”表示。熱阻是指微生物在某一特定條件(主要是溫度和加熱方式)下的致死時(shí)間。相對熱阻是指微生物在某一特定條件下的致死時(shí)間與另一微生物在相同條件下的致死時(shí)間的比值。表5-5列出了某些微生物的相對熱阻。

表5-5某些微生物的相對熱阻及其對一些滅菌劑的相對抵抗力(大腸桿菌相比較)

滅菌方式大腸桿菌霉菌孢子細(xì)菌芽孢嗜菌體或病毒

干熱滅菌1 2-10 1000 1

濕熱滅菌1 2-10 3×1051-5

苯酚1 1-2 1×10930

甲醛1 2-10 250 2

紫外線1 5-100 2-5 5-10

由表5-5可知，芽孢或孢子的熱阻要比生長期營養(yǎng)細(xì)胞的熱阻大得多，這是由于芽孢或孢子內(nèi)吡啶二羧酸含量對熱阻的增加有關(guān)。另外，芽孢子中蛋白質(zhì)含水量較營養(yǎng)細(xì)胞低(特別是游離水分少)，也是芽孢耐熱強(qiáng)的一個(gè)原因。圖5-2和圖5-3分別為大腸桿菌營養(yǎng)細(xì)胞和FS7954芽孢桿菌的芽孢在不同溫度下的死亡情況。

5.3濕熱滅菌原理和影響滅菌的因素

在發(fā)酵工業(yè)中，對培養(yǎng)基和發(fā)酵設(shè)備的滅菌，廣泛使用濕熱滅菌法。工廠里，蒸汽比較容易獲得，控制操作條件方便，是一種簡單而又價(jià)廉、有效的滅菌方法。用濕熱滅菌的方法處理培養(yǎng)基，其加熱溫度和受熱時(shí)間與來菌程度和營養(yǎng)成分的破壞都有關(guān)系。營養(yǎng)成分的養(yǎng)活將影響菌種的培養(yǎng)和產(chǎn)物的生成，所以滅菌程度和營養(yǎng)成分的破壞成為滅菌工作中的主要矛盾，恰當(dāng)掌握加熱溫度和受熱時(shí)間是滅菌工作的關(guān)鍵。

5.3.1滅菌動(dòng)力學(xué)

1. 微生物的死亡速率

1)對數(shù)殘留定律

微生物受熱死亡的原因，主要是因高溫使微生物體內(nèi)的一些重要蛋白質(zhì)，如酶等，發(fā)生凝固、變性，從而導(dǎo)致微生物無法生存而死亡。微生物受熱而喪失活力，但其物理性質(zhì)不變。在一定溫度下，微生物的受熱死亡遵照分子反應(yīng)速度理論。在滅菌過程中，活菌數(shù)逐漸減少，其減少量隨殘留活菌數(shù)的減少而遞減，即微生物的死亡速率與任一瞬時(shí)殘存的活菌數(shù)成正比，如圖5-2所示，大腸桿菌的死亡曲線為線性關(guān)系，稱之為對數(shù)殘留定律，也即反映為一級化學(xué)反應(yīng)動(dòng)力學(xué)為：

-dN/dt=KN

式中，N—?dú)埓娴幕罹鷶?shù);t—滅菌時(shí)間(s);K—滅菌速度常數(shù)(s-1)，與稱反應(yīng)速度常數(shù)或比死亡速度常數(shù)，此常數(shù)的大小與微生物的種類與加熱溫度有關(guān);dN/dt—活菌數(shù)瞬時(shí)變化速率，即死亡速率。

上式通過積分可得：Nt/N0=e-kt

t=1/KlnN0/Nt=2.303/KlgN0/Nt

式中：N0—開始滅菌(t=0)時(shí)原有活菌數(shù);Nt=經(jīng)時(shí)間t后殘存活菌數(shù)。

上式是計(jì)算滅菌的基本公式，滅菌速度常數(shù)K是判斷微生物受熱死亡難易程度的基本依據(jù)。各種微生物在同樣的溫度下K值是不同的，K值愈小，則此微生物愈耐熱。

即使對于同一微生物，也受微生物的生理狀態(tài)、生長條件及滅菌方法等多種因素的影響，其營養(yǎng)細(xì)胞和芽孢的比死亡速率也有極大的差異，就微生物的熱阻來說，細(xì)菌芽孢是比較耐熱的，孢子的熱阻要比生長期細(xì)胞大得多。例如，在121℃時(shí)，枯草桿菌FS5230的K為0.47-0.063s-1，梭狀芽孢桿菌PA3679的K為0.03s-1，嗜熱芽孢桿菌FS1518的K為0.013s-1，熱芽孢桿菌FS617的K為0.048s-1。

從上述的微生物對數(shù)死亡規(guī)律和非對數(shù)死亡動(dòng)力學(xué)模型方程式可知，如果要達(dá)到徹底滅菌，即滅菌結(jié)束時(shí)殘留的活微生物數(shù)等于0，則滅菌所需的時(shí)間應(yīng)為無限長，這在實(shí)際中是不可能的。因此，工程上，在進(jìn)行滅菌的設(shè)計(jì)時(shí)，常認(rèn)為N/N0=0.001，即在1000次滅菌中，允許有一次失敗。

5.3.2滅菌的溫度和時(shí)間

微生物的受熱死亡屬于單分子反應(yīng)，其滅菌速率常數(shù)K與溫度之間的關(guān)系可用阿累尼烏斯公式表示：

K=Aexp(-ΔE/RT) (5.8)

或 lnK=lnA--ΔE/RT (5.9)

式中：A---頻率常數(shù)，也稱阿累尼烏斯常數(shù)，s-1;R---氣體常數(shù)，8.314J/mol·K;T---絕對溫度，K;ΔE---微生物死亡活化能，J/mol。

由此可見，ΔE/R是微生物受熱死亡時(shí)對溫度敏感性的度量，此值越大，表明微生物死亡速率隨溫度的變化越敏感;反之，就越不敏感，因此，在滅菌操作中，ΔE/R是一個(gè)十分重要的參數(shù)。

當(dāng)培養(yǎng)基被加熱滅菌時(shí)，常會(huì)出現(xiàn)這樣的矛盾，這就是，加熱時(shí)，微生物固然會(huì)被殺死，但培養(yǎng)基中的有用成分也會(huì)隨之遭到破壞，那么有何良策可以既達(dá)到滅菌要求，同時(shí)又不破壞或盡可能少破壞培養(yǎng)基中的有用成分呢?

實(shí)踐證明，在高壓加熱的情況下，培養(yǎng)基中的氨基酸和維生素極易被破壞，如在121℃，僅20min，就有59%的賴氨酸和精氨酸及其他堿性氨基酸被破壞，蛋氨酸和色氨酸也有相當(dāng)數(shù)量被破壞。因此，必須選擇一個(gè)既能滿足滅菌需要，又可使培養(yǎng)基的破壞盡可能養(yǎng)活的滅菌工藝條件。

由于滅菌時(shí)殺死微生物的活化能大于培養(yǎng)基成分的破壞活化能值，因此：

即隨著溫度的上升，微生物的死亡速率常數(shù)增加倍數(shù)要大于培養(yǎng)基成分的破壞速率的增加倍數(shù)。也就是說，當(dāng)滅菌溫度上升時(shí)，微生物殺死速率的提高要超過培養(yǎng)基成分的破壞速率的增加。

從上述的分析可知，在熱滅菌過程中，同時(shí)會(huì)發(fā)生微生物死亡和培養(yǎng)基破壞這兩種過程，且這兩種過程的進(jìn)行速度都隨溫度的升高而加速，但微生物的死亡速率隨溫度的升高更為顯著。因此，可選擇合適的滅菌溫度和時(shí)間來調(diào)和二者之間的矛盾。

一個(gè)事例為，滅菌要達(dá)到殺死99.99%的細(xì)菌芽孢，有兩種方法可以采用，一種是118滅菌15min，另一種是128滅菌5min。而培養(yǎng)基中B族維生素的保留值在前一種方式為90%，后一種方式為95%。由此可見，在高溫下滅菌，時(shí)間是一個(gè)非常重要的因素，圖5-6和表5-8分別表示殺死細(xì)菌芽孢與保留B族維生素的時(shí)間與溫度關(guān)系以及在不降低規(guī)定的滅菌前提下()，滅菌溫度、時(shí)間和營養(yǎng)成分破壞量的關(guān)系。

表5-8滅菌溫度、時(shí)間與營養(yǎng)成分破壞量的關(guān)系()

滅菌溫度滅菌時(shí)間(分)營養(yǎng)成分破壞量%

100 400 99.3

110 36 67.0

115 15 50.0

120 4 27.0

130 0.5 8.0

145 0.08 2.0

150 0.01 1.0

由此可見，若要減少營養(yǎng)成分的破壞，可升高溫度滅菌。

據(jù)此，可以在滅菌時(shí)選擇較高的溫度、較短的時(shí)間，這樣便既可達(dá)到需要的滅菌程度，同時(shí)又可減少營養(yǎng)物質(zhì)的損失。

5.3.3影響滅菌的因素

1) 培養(yǎng)基成分

固體培養(yǎng)基的滅菌時(shí)間要比液體培養(yǎng)基的滅菌時(shí)間長。

2) 培養(yǎng)基的物理狀態(tài)

培養(yǎng)基的PH值愈低，滅菌所需的時(shí)間就愈短。

3) 培養(yǎng)基的PH值

4) 培養(yǎng)基中的微生物數(shù)量

因此，在實(shí)際生產(chǎn)中，不宜采用嚴(yán)重霉腐的原料和腐敗的水質(zhì)，因?yàn)檫@類原料中不但有效成分少，而且微生物數(shù)量中，徹底滅菌比較困難。

5) 微生物細(xì)胞中水含量

6) 微生物細(xì)胞菌齡

年輕細(xì)胞容易被殺死。

7) 微生物的耐熱性

各種微生物對熱的抵抗力是不同的，細(xì)菌的營養(yǎng)體、酵母、霉菌的菌絲體對熱較為敏感，而放線菌、酵母、霉菌孢子比營養(yǎng)細(xì)胞的抗熱性要強(qiáng)，細(xì)菌芽孢的抗熱性就更強(qiáng)。一般講，無芽孢的細(xì)菌或霉菌孢子在100以下加熱3-5min都可被殺死，但是有些細(xì)菌芽孢的熱阻較大，100、30min仍未被殺死，所以滅菌的徹底與否應(yīng)以殺死細(xì)菌孢為標(biāo)準(zhǔn)。

8) 空氣排除情況

蒸汽滅菌過程中，溫度的控制是通過控制罐內(nèi)的蒸汽壓力來實(shí)現(xiàn)。壓力表顯示的壓力應(yīng)與罐內(nèi)蒸汽壓力相對應(yīng)，即壓力表的壓力所對應(yīng)的溫度應(yīng)是罐內(nèi)的實(shí)際溫度。但是如果罐內(nèi)空氣排除不完全，壓力表所顯示的壓力就不單是罐內(nèi)蒸汽壓力，還包括了空氣分壓，因此，此時(shí)罐內(nèi)的實(shí)際溫度就低于壓力表顯示壓力所對應(yīng)的溫度，鳳致造成滅菌溫度不夠而滅菌不徹底，如表5-12所示。

表5-12蒸汽壓力與溫度的關(guān)系

蒸汽壓力(atm) 相應(yīng)的溫度(℃)空氣完全驅(qū)除程度罐內(nèi)實(shí)際溫度(℃)

0.3 107.7 完全驅(qū)除121.6

0.7 115.5 驅(qū)除非/3 115.0

1.0 121.6 驅(qū)除此之外/2 112.0

1.3 126.6 驅(qū)除此之外/3 109.0

1.5 130.5 全未驅(qū)除100.0

9) 攪拌

10) 泡沫

5.4間歇滅菌

5.4. 1間歇滅菌

培養(yǎng)基的間歇滅菌就是將配制好的培養(yǎng)基放在發(fā)酵罐或其他裝置中，通入蒸汽將培養(yǎng)基和所用設(shè)備一起進(jìn)行加熱滅菌的過程，通常也稱為實(shí)罐滅菌。

間歇滅菌過程包括升溫、保溫和冷卻等三個(gè)階段，圖5-7為培養(yǎng)基間歇滅菌過程中的溫度變化情況。

5.4.2間歇滅菌的計(jì)算

嚴(yán)格地講在升溫階段的后期和冷卻階段的前期，培養(yǎng)基的溫度很高，因而具有一定的滅菌作用。

由此可見，滅菌過程中加熱和保溫階段的滅菌作用是主要的，而冷卻階段的滅菌作用是次要的，一般很小，可以忽略不計(jì)。此外，還應(yīng)指出的是，應(yīng)當(dāng)避免過長時(shí)間的加熱階段，因?yàn)榧訜釙r(shí)間過長，不僅會(huì)破壞營養(yǎng)物質(zhì)，而且也有可能引起培養(yǎng)液中某些有害物質(zhì)的生成，從而影響培養(yǎng)過程的順利進(jìn)行。

在實(shí)際生產(chǎn)中，也可能遇到所供蒸汽不足、溫度不夠高的情況，這時(shí)可以適當(dāng)延長滅菌

時(shí)間。生產(chǎn)上甚至有用100蒸煮而達(dá)到徹底滅菌的實(shí)例。如要做固體曲而沒有高溫蒸汽

時(shí)，可將原料用100蒸汽蒸30min，殺死其中的營養(yǎng)細(xì)胞，但孢子與細(xì)菌的芽孢沒有被

殺死。將蒸過的原料置于室溫下過夜，未被殺死的孢子便發(fā)芽生長，芽孢發(fā)育成營養(yǎng)細(xì)

胞，再蒸30min便可殺死。如此連續(xù)反復(fù)進(jìn)行2-3次，亦可達(dá)到徹底滅菌的目的。

5.4.3間歇滅菌的操作

間歇滅歇是在所用的發(fā)酵罐或其他培養(yǎng)裝置中進(jìn)行的，它是在配制罐中配好培養(yǎng)基后，通過專用管道輸入發(fā)酵罐等培養(yǎng)設(shè)備中，然后開始滅菌。在進(jìn)行培養(yǎng)基的間歇滅菌之前，通常先將發(fā)酵罐等培養(yǎng)裝置的分空氣過濾器進(jìn)行滅菌，并且用空氣將分過濾器吹干。開始滅菌時(shí)，應(yīng)先放去夾套或蛇管中的冷水，開啟排氣管閥，通過空氣管向發(fā)酵罐內(nèi)的培養(yǎng)基通入蒸汽進(jìn)行加熱，同時(shí)，也可在夾套內(nèi)通蒸汽進(jìn)行間接加熱。當(dāng)培養(yǎng)基溫度升到

70左右時(shí)，從取樣管和放料管向罐內(nèi)通入蒸汽進(jìn)一步加熱，當(dāng)溫度升至120，罐壓為1*105Pa(表壓)時(shí)，打開接種、補(bǔ)料、消泡劑、酸、堿等管道閥門進(jìn)行排汽，當(dāng)然在保溫過程中，應(yīng)注意凡在培養(yǎng)基液面下的各種進(jìn)口管道都應(yīng)通入蒸汽，而在液面以上的其余各管道則應(yīng)排放蒸汽，這樣才能不留死角，從而保證滅菌徹底。保溫結(jié)束后，依次關(guān)閉各排汽、進(jìn)汽閥門，待罐內(nèi)壓力低于空氣壓力后，向罐內(nèi)通入無菌空氣，在夾套或蛇管中通冷水降溫，使培養(yǎng)基的溫度降到所需的溫度，進(jìn)行下一步的發(fā)酵和培養(yǎng)。

由于培養(yǎng)基的間歇滅菌不需要專門的滅菌設(shè)備，投資少，對設(shè)備要求簡單，對蒸汽的要求也比較低，且滅菌效果可靠，因此，間歇滅菌是中小型生產(chǎn)工廠經(jīng)常采用的一種培養(yǎng)基滅菌方法。

5.5連續(xù)滅菌

5.5. 1培養(yǎng)基的連續(xù)滅菌

培養(yǎng)基的連續(xù)滅菌，就是將配制好的培養(yǎng)基在向發(fā)酵罐等培養(yǎng)裝置輸送的同時(shí)進(jìn)行加熱、保溫和冷卻而進(jìn)行滅菌。圖5-9為連續(xù)滅菌過程中溫度的變化情況。由圖可以看出，連續(xù)滅菌時(shí)，培養(yǎng)基可在短時(shí)間內(nèi)加熱到保溫溫度，并且能很快地被冷卻，因此可在比間歇滅菌更高的溫度下進(jìn)行滅菌，而由于滅菌溫度很高，保溫時(shí)間就相應(yīng)地可以很短，極有利于減少培養(yǎng)基中的營養(yǎng)物質(zhì)的破壞。

5.5. 2連續(xù)滅菌的基本流程

培養(yǎng)基連續(xù)滅菌的基本流程如圖5-10所示。連續(xù)滅菌的基本設(shè)備一般包括(1)配料預(yù)熱罐，將配制好的料液預(yù)熱到60-70，以避免連續(xù)滅菌時(shí)由于料液與蒸汽溫度相差過大而產(chǎn)生水汽撞擊聲;(2)連消塔，連消塔的作用主要是使高溫蒸汽與料液迅速接觸混和，并使料液的溫度很快升高到滅菌溫度(126-132);(3)維持罐，連消塔加熱的時(shí)間很短，光靠這段時(shí)間的滅菌是不夠的，維持罐的作用是使料液在滅菌溫度下保持5-7min，以達(dá)到滅菌的目的;(4)冷卻管，從維持罐出來的料液要經(jīng)過冷卻排管進(jìn)行冷卻，生產(chǎn)上一般采用冷水噴淋冷卻，冷卻到40-50后，輸送到預(yù)先已經(jīng)滅菌過的罐內(nèi)。

圖5-11為噴射加熱連續(xù)滅菌流程，流程中采用了蒸汽噴射器，它使培養(yǎng)液與高溫蒸汽直接接觸，從而在短時(shí)間內(nèi)可將培養(yǎng)液急速升溫至預(yù)定的滅菌溫度然后在該溫度下維持一段時(shí)間滅菌，滅菌后的培養(yǎng)基通過一膨脹閥進(jìn)入真空冷卻器急速冷卻，從圖中可以看出，由于該流程中培養(yǎng)基受熱時(shí)間短，營養(yǎng)物質(zhì)的損失也就不很嚴(yán)重，同時(shí)該流程保證了培養(yǎng)基物料先進(jìn)先出，避免了過熱或滅菌不徹底等現(xiàn)象。

圖5-12為薄板換熱器連續(xù)滅菌流程，流程中采用了薄板換熱器作為培養(yǎng)液的加熱和冷卻器，蒸汽在薄板換熱器的加熱段使培養(yǎng)液的溫度升高，經(jīng)維持段保溫一定時(shí)間后，培養(yǎng)基在薄板換熱器的冷卻段進(jìn)行冷卻，從而使培養(yǎng)基的預(yù)熱、加熱滅菌及冷卻過程可在同一設(shè)備內(nèi)完成。該流程的加熱和冷卻時(shí)間比噴射加熱連續(xù)滅菌流程要長些，但由于在培養(yǎng)基的預(yù)熱過程同時(shí)也起到了滅菌后培養(yǎng)基的冷卻，因而節(jié)約了蒸汽和冷卻水的用量。

培養(yǎng)基的連續(xù)滅菌的優(yōu)點(diǎn)是滅菌的溫度較高，滅菌時(shí)間較短，培養(yǎng)基的營養(yǎng)成分受砉珠程度較低，從而保證了培養(yǎng)基的質(zhì)量，同時(shí)由于連續(xù)滅菌過程不在發(fā)酵罐等設(shè)備中進(jìn)行，提高了發(fā)酵罐等設(shè)備的利用率。當(dāng)然與間歇滅菌過程相比，連續(xù)滅菌過程的不足之處是過程所需的設(shè)備較多，操作較為麻煩，染菌機(jī)會(huì)也相應(yīng)較多。

培養(yǎng)基采用連續(xù)滅菌時(shí)，加熱器、維持罐(管)和冷卻器以及發(fā)酵罐等都應(yīng)先進(jìn)滅菌，然后才能進(jìn)行培養(yǎng)基的連續(xù)滅菌。同時(shí)組成培養(yǎng)基的耐熱性物質(zhì)和不耐熱性物質(zhì)可在不同溫度下分開滅菌，以減少物質(zhì)的受熱破壞程度，也可將碳源與氮源分開滅菌，以免醛基與氨基發(fā)生反應(yīng)，防止有害物質(zhì)的生成。

5.6間歇滅菌與連續(xù)滅菌的比較

間歇滅菌或連續(xù)滅菌都有各自的優(yōu)點(diǎn)和缺點(diǎn)，現(xiàn)比較如下。

表5-14間歇滅菌與連續(xù)滅菌的比較

由表可見，無論在理論上或者在實(shí)踐上，與間歇滅菌過程相比，連續(xù)滅菌的優(yōu)點(diǎn)十分明顯。因此，連續(xù)滅菌越來越多地被用培養(yǎng)基的滅菌。